細(xì)胞培養(yǎng)中血清的作用及選擇參考事項(xiàng)

血清的主要成分是蛋白質(zhì)，血清的組成成分與含量常常與供血?jiǎng)游镄詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件有關(guān)。需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃冰箱（未開(kāi)封血清有效期為5年）。若存放于4℃，請(qǐng)勿超過(guò)1個(gè)月，若一次無(wú)法用完一瓶，建議將血清無(wú)菌分裝并冷凍。

血清在細(xì)胞培養(yǎng)中起著重要的作用，具體分為：
1.提供生長(zhǎng)因子和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：血清中含有多種生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可以為細(xì)胞提供必需的生長(zhǎng)因子和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。
2.維持細(xì)胞形態(tài)和功能：血清中的成分可以維持細(xì)胞的形態(tài)和功能，使細(xì)胞保持其特定的形態(tài)和表型特征。
3.促進(jìn)細(xì)胞附著和增殖：血清中的成分可以提供細(xì)胞所需的黏附分子，促進(jìn)細(xì)胞附著在培養(yǎng)表面，并提供細(xì)胞增殖所需的信號(hào)分子。
4.抗氧化和抗炎作用：血清中的成分具有抗氧化和抗炎作用，可以保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)的損傷。
盡管血清在細(xì)胞培養(yǎng)中具有多種優(yōu)點(diǎn)，但也存在一些限制和弊端，如批次間變異性、潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)、成本高昂以及倫理問(wèn)題。近年來(lái)研究人員也在努力開(kāi)發(fā)無(wú)血清培養(yǎng)體系，以替代傳統(tǒng)的血清培養(yǎng)方法。現(xiàn)在生物制藥中使用無(wú)血清培養(yǎng)基已成為大趨勢(shì)，倍諳基已針對(duì)不同細(xì)胞自主研發(fā)的近百款目錄型無(wú)血清培養(yǎng)基，適用于抗體蛋白表達(dá)、疫苗生產(chǎn)及細(xì)胞與基因治療等多個(gè)領(lǐng)域。

血清在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中如此重要，那么選擇靠譜的血清事項(xiàng)參考如下：
1.中國(guó)海關(guān)允許進(jìn)口的血源地
世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）對(duì)國(guó)家或地區(qū)動(dòng)物感染性疾病有相關(guān)評(píng)價(jià)指標(biāo)，如瘋牛病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)指標(biāo)GBR就是根據(jù)瘋牛病風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)進(jìn)行地域性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及分類。目前世界上僅有一些少數(shù)國(guó)家在OIE對(duì)牛類風(fēng)險(xiǎn)性疾病的評(píng)估中符合中國(guó)海關(guān)要求，因此中國(guó)海關(guān)允許進(jìn)口的血清來(lái)源地有澳大利亞、新西蘭、烏拉圭，這些國(guó)家來(lái)源的牛血類制品的生物安全等級(jí)較高，科研人員在使用相關(guān)來(lái)源的血類制品時(shí)極大降低了感染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，市面上其他血源地的血清都是非法走私血清，要選擇在瓶身明確標(biāo)注來(lái)源地的血清產(chǎn)品。
2.血源可溯性
由于血清利潤(rùn)價(jià)值高昂、血源緊缺、不同原產(chǎn)國(guó)血清價(jià)格有差異、通過(guò)偽造血清來(lái)源從而進(jìn)行利潤(rùn)賺取使血清用戶深受困擾等原因，使得血源可溯源至關(guān)重要。目前血清行業(yè)中有Oritain指紋識(shí)別技術(shù)，該技術(shù)可為每批血清進(jìn)行來(lái)源溯源認(rèn)證，有效證實(shí)血清產(chǎn)品來(lái)源。
3.國(guó)際機(jī)構(gòu)認(rèn)證
國(guó)際血清行業(yè)協(xié)會(huì)（ISIA）成立于2006年6月，旨在建立全球動(dòng)物血清和動(dòng)物源性產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，促進(jìn)和確保血清和動(dòng)物源性產(chǎn)品供應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)和倫理規(guī)范，現(xiàn)已成為血清行業(yè)規(guī)范及血清供應(yīng)商身份驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)的制定者。ISIA實(shí)施了供應(yīng)鏈可追溯性的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，這對(duì)確保血清各個(gè)批次的質(zhì)量、安全性和重復(fù)性起了關(guān)鍵作用。該組織在胎牛血清生產(chǎn)過(guò)程中主要對(duì)原料采集、血清加工、產(chǎn)品質(zhì)檢和出國(guó)運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)進(jìn)行監(jiān)控及認(rèn)證。
4.進(jìn)口合規(guī)性
合規(guī)的進(jìn)口血清應(yīng)該具備多項(xiàng)資質(zhì)證明文件，包括原產(chǎn)地證明、衛(wèi)生證/健康證/農(nóng)業(yè)部非疫區(qū)證明、進(jìn)口貨物報(bào)關(guān)單以及入境貨物檢驗(yàn)檢疫證明。其中原產(chǎn)地證明（CERTIFICATE OF ORIGIN）可以追溯貨物原產(chǎn)地或制造地，衛(wèi)生證/健康證/農(nóng)業(yè)部非疫區(qū)證明（ HC, HEALTH CERTIFICATE, TES/BSE）可以確保血清供體來(lái)源是健康、非疫區(qū)和無(wú)傳染病的。
5.嚴(yán)格質(zhì)控
由于牛血清在人用疫苗和獸用疫苗等生物制藥生產(chǎn)中非常重要，很多國(guó)家都將其納入藥典，在我國(guó)的中華人民共和國(guó)藥典Ch.P、美國(guó)藥典USP和歐洲藥典 EP 中都規(guī)定了牛血清的定義和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，如內(nèi)毒素、總蛋白含量、血紅蛋白、PH、微生物、免疫球蛋白、抗生素等。此外，9種牛類傳染性疾病的檢測(cè)結(jié)果也十分重要，分別是牛呼吸道融合病毒(BRSV)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、 牛細(xì)小病毒(BPV)、藍(lán)舌病毒(BTV)、 牛腺病毒(BAdV)、狂犬病毒(RABV)和呼吸道腸道病毒(REO)等，這些病毒部分是人畜共患病，病毒檢測(cè)不合格的血清甚至?xí)绊懣蒲腥藛T的健康與安全。因此我們要選擇質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格按照各國(guó)藥典要求，并遵循FDA頒布執(zhí)行的cGMP規(guī)范生產(chǎn)流程的血清供應(yīng)商，可在血清生產(chǎn)等各個(gè)環(huán)節(jié)保證產(chǎn)品質(zhì)量。
6.批間差異小
批間差異小的血清不僅可以保證血清質(zhì)量，確保細(xì)胞培養(yǎng)效果，還能減少由于批間差異帶來(lái)的使用前測(cè)試，且避免實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不可重復(fù)性。